細(xì)胞名稱 肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞；AE1201
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況: C6
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞；AE1201 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63696 |
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Picrinine
CAS No.：4684-32-6
中文名：鴨腳樹葉
分子式：C20H22N2O3
豆蔻甘油三酯;Tritetradec 訂購|咨詢 脂素1(LPIN1) 規(guī)格： 20mg
七葉皂苷 Ib;Escin Ib 訂購|咨詢 脂素2(LPIN2) 規(guī)格： 10mg
去氧內(nèi)酯;Deoxyandrogr 訂購|咨詢 脂素3(LPIN3) 規(guī)格： 20mg
素;Artemisinin 訂購|咨詢 脂氧素A4(LXA4) 規(guī)格： 20mg
檸檬苦素;Limonin 訂購|咨詢 脂蛋白a(Lpa) 規(guī)格： 20mg
川芎嗪;Tetramethylpyr 訂購|咨詢 脂蛋白a(Lpa) 規(guī)格： 20mg
秋水仙苷;Thiocolchicosi 訂購|咨詢 脂蛋白關(guān)聯(lián)脂酶A2(LpPLA2) 規(guī)格： 20mg
六氫羧;DLPipecolini 訂購|咨詢 脂蛋白關(guān)聯(lián)脂酶A2(LpPLA2) 規(guī)格： 20mg
科羅索;Corosolic acid 訂購|咨詢 脂蛋白關(guān)聯(lián)脂酶A2(LpPLA2) 規(guī)格： 20mg
肌; Isitol 訂購|咨詢 脂蛋白關(guān)聯(lián)脂酶A2(LpPLA2) 規(guī)格： 20mg
槲皮素3OβD葡糖糖7O 訂購|咨詢 脂蛋白脂酶(LIPD) 規(guī)格： 20mg
槲皮苷;Quercitrin 訂購|咨詢 脂蛋白脂酶(LIPD) 規(guī)格： 20mg
格列風(fēng)內(nèi)酯;Griffonilide 訂購|咨詢 脂蛋白脂酶(LIPD) 規(guī)格： 20mg
佛手柑內(nèi)酯;Bergapten 訂購|咨詢 脂聯(lián)素(ADP) 規(guī)格： 20mg
冬綠苷;Gaultherin 訂購|咨詢 脂聯(lián)素(ADP) 規(guī)格： 20mg
蛋;LMethionine 訂購|咨詢 脂聯(lián)素(ADP) 規(guī)格： 20mg
橙黃決明素6葡萄糖苷; 訂購|咨詢 脂聯(lián)素(ADP) 規(guī)格： 10mg
川芎嗪;Tetramethylpyraz 訂購|咨詢 脂聯(lián)素(ADP) 規(guī)格： 30mg
AUTS2 孤獨(dú)癥易感基因2蛋白抗體（自閉癥相關(guān)蛋白1） 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Disulfiram
RABX5/Rabex5 G蛋白相關(guān)RABX5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Myricetin
PPAPDC3 脂酶2結(jié)構(gòu)域3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Myricetin
CCDC69 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白69抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Deoxycholic acid
CCDC50 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml βCyclodextrin
CCDC98 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白98抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ramipril
CCDC47 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ramipril
CCDC70 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白70抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml
羧噻吩青 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Ticarcillindisodiumsalt 含量:BR，85%
羧 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Pyrazinecarboxamide 含量:BR
羧肽酶A（牛胰） 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:CarboxypeptidaseA 含量:高純，95%
羧肽酶Y（酵母） 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:CarboxypeptidaseY(Yeast) 含量:細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)，85%
臺(tái)盼藍(lán) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Trypanblue 含量:超純，99%
苔紅素 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Orcein 含量:AR，85%
肽聚糖 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:PGN 含量:BR
肽鏈端解酶 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Peptidase 含量:BR，92%，三水物
鈦黃 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Titanyellow 含量:生物技術(shù)級(jí)
鈦異酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:TPT 含量:超純，99%
肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞；AE1201支原體瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基規(guī)格：BR50g詳情介紹
Hanks氏病保存液（pH7.4-7.6）規(guī)格：3ml*36支/盒用途：用于hanks病的保存
L-賴氨鹽鹽規(guī)格：25g用途：微生物指示劑
乳桿菌選擇性肉湯規(guī)格：250g用途：用于軟桿菌增菌培養(yǎng)
L-鼠李糖規(guī)格：20支詳情介紹
CDC厭氧菌瓊脂規(guī)格：1用途：0.01g每支含量
點(diǎn)擊放大
會(huì)員_a.png)